使用酶標儀測定黃曲霉毒素，常采用酶聯免疫吸附測定（ELISA）法，以下是具體的操作步驟：

        樣品準備：稱取一定量的食用油或其他含油食品樣品，用適當的提取溶劑（如甲醇 - 水混合溶液，常見比例為 7:3）進行提取。將樣品充分振蕩、離心，使黃曲霉毒素溶解在提取液中。然后取一定量的上清液，根據需要進行適當稀釋，以確保后續檢測時樣品中黃曲霉毒素的濃度在標準曲線范圍內。

        試劑準備：準備黃曲霉毒素 ELISA 檢測試劑盒，該試劑盒通常包含包被有黃曲霉毒素抗原的微孔板、黃曲霉毒素標準品（不同濃度梯度，如 0、5、10、20、50、100 ng/mL 等）、酶標記物（一般是酶標記的抗黃曲霉毒素抗體）、洗滌液、底物溶液和終止液等。

        加樣：在微孔板中加入不同濃度的黃曲霉毒素標準品，每個濃度設置至少 2 個平行孔，作為標準曲線的參考點。同時，加入適量的處理好的樣品溶液到相應的孔中，同樣設置平行孔。另外，還需設置空白對照孔（通常加入等量的提取溶劑或稀釋液）和陰性對照孔（加入已知不含黃曲霉毒素的樣品提取液）。

        溫育反應：將微孔板放入恒溫培養箱中，在適宜的溫度（如 37℃）下溫育一定時間（如 30 分鐘至 1 小時），使樣品中的黃曲霉毒素與包被在微孔板上的抗原充分競爭結合有限的抗體結合位點。

        洗滌：溫育結束后，棄去孔內液體，用洗滌液充分洗滌微孔板，一般洗滌 3-5 次，每次浸泡 1-2 分鐘，以去除未結合的物質，減少非特異性吸附帶來的干擾。

        加酶標記物：向每個孔中加入適量的酶標記物，使酶標記的抗黃曲霉毒素抗體與結合在微孔板上的黃曲霉毒素發生特異性結合。然后再次將微孔板放入恒溫培養箱中，在適宜溫度下溫育一定時間（如 30 分鐘左右）。

        洗滌：重復上述洗滌步驟，徹底洗去未結合的酶標記物。

        加底物顯色：向每個孔中加入適量的底物溶液，酶標記物中的酶會催化底物發生顯色反應，產生有色物質。在適宜溫度下避光反應一定時間（如 15-30 分鐘），使顏色充分發展。

        終止反應：加入終止液，終止酶促反應，使顏色穩定下來。此時，溶液的顏色深淺與樣品中黃曲霉毒素的含量呈負相關，即樣品中黃曲霉毒素含量越高，與包被抗原結合的抗體就越少，酶標記物結合的量也越少，顯色反應就越弱，顏色越淺。

        測定吸光度：將微孔板放入酶標儀中，選擇合適的波長（一般為 450 nm），測定每個孔的吸光度（OD 值）。

        繪制標準曲線和計算結果：以黃曲霉毒素標準品的濃度為橫坐標，對應的平均 OD 值為縱坐標，繪制標準曲線。根據樣品孔的平均 OD 值，從標準曲線上查得對應的黃曲霉毒素濃度，再根據樣品的稀釋倍數和稱樣量，計算出樣品中黃曲霉毒素的實際含量。

        通過以上步驟，利用酶標儀結合 ELISA 法可以準確測定食品中黃曲霉毒素的含量。

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